大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）说明书-会议论文集-资讯-生物在线

大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫检测

试剂盒使用说明书

使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α），只能用于研究用途，不得用于医学诊断。

用途：用于大鼠血清、血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的测定。

工作原理

本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。向预先包被了大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）单克隆抗体的酶标孔中加入大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α），温育；温育后，加入生物素标记的抗TNF-α抗体。再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）的浓度呈正相关。

试剂盒组成

试剂盒组成	48孔配置	96孔配置	保存
说明书	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1个	1个
酶标包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
标准品：480ng/L	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
标准品稀释液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
链霉亲和素-HRP	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
生物素标记的抗TNF-α抗体	0.5ml×1瓶	1 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
终止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
浓缩洗涤液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

需要而未提供的试剂和器材

1． 37℃恒温箱。

2．标准规格酶标仪。

3．精密移液器及一次性吸头

4．蒸馏水，

5．一次性试管

6．吸水纸

注意事项

1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差

3．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

5．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求

1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

操作程序

1. 标准品的稀释：(本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

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